O-糖蛋⽩酶，质谱级
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HLS IMPA001 O-糖蛋⽩酶 50μl
说明：O-Glycoprotease是 Pseudomonas aeruginosa 分泌的免疫⾦属蛋⽩酶(IMPa)，特异性切割 O-糖基化修饰的糖蛋⽩或糖肽中丝氨酸
(S)或苏氨酸(T)肽键N-端。对于 O-1inked聚糖含唾液酸和不含唾液酸的粘蛋⽩S/T氨基酸没有选择性。⽤于 O-糖基化修饰蛋⽩表征和糖
蛋⽩O-糖苷结构的分析
物理形态：20mM Tris-HCl(pH7.8 at 25°C) ，100mM NaCl 溶液
分⼦量：97kDa
浓度：1ug/ul
储存条件：-20°C冰箱冷冻
保质期：-20°C冰箱保存24个⽉
pH 值范围：O-糖蛋⽩酶在 pH7-8 活性最佳
酶切⽅法：
-适⽤酶切缓冲溶液:20mmol Tris or HEPES 缓冲液； pH 值在 7-8 范围内
-去除表⾯活性剂的⾮变性或变性糖蛋⽩样品，按照20:1蛋⽩和蛋⽩酶的量使⽤，酶切反应蛋⽩浓度控制在0.2-0.5ug/u1，37°C⼲浴孵育
2⼩时以上
-敏感性：O-糖蛋⽩酶对SDS，表⾯活性剂敏感;PH 缓冲液严格控制在 7-8 范围内，否则酶活性降低
质量控制 ｜Quality Control
纯度：液相⾊谱280nm检测杂质蛋⽩质峰强度，O-糖蛋⽩酶⾊谱峰强度⼤于 99.0%
专⼀性：⽜⾎清胎球蛋⽩Fetuin，变性酶切，zic-hilic富集，ESI-MS/MS质谱分析O-糖修饰的 S/T 专⼀性⼤于 95%
活性：50000unit/mg
单位定义：1ug/u1 O-糖蛋⽩酶稀释 10倍，与5umol Fetuin糖蛋⽩反应的量，反应条件: 20ul 20mol Tris，pH=8.0，37°c⼲浴孵育2⼩时，
SDS-PAGE 电泳分析
LC-MS/MS 质谱分析：20ug Fetuin 糖蛋⽩ BT试剂变性，还原烷基化，UFD超滤脱盐，加 100ul 20mmol Tris， 1ul O-糖蛋⽩酶孵育2⼩
时，通过 zic-hilic Tip 柱富集， Q-E480 液质分析，完整鉴定 S/T位点修饰和O-糖修饰组成。
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